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轉(zhuǎn)染試劑那些事兒

  • 發(fā)布日期:2020-03-17      瀏覽次數(shù):3610
    • 轉(zhuǎn)染技術(shù)新寵-陽離子聚合物基因轉(zhuǎn)染技術(shù)

      適用宿主廣泛,操作簡便,細胞毒性小,轉(zhuǎn)染率高。其中聚乙烯亞胺(PEI)的轉(zhuǎn)染性能比較好。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,每相隔兩個碳原子,就是第三個原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子,使得聚合物網(wǎng)絡在任何PH下都能充當有效的“質(zhì)子海綿”體。這種聚陽離子能將各種報告基因轉(zhuǎn)入各種種屬細胞,其效果好于脂質(zhì)聚酰胺,而且細胞毒性低。大量實驗證明,PEI是非常有希望的基因治療載體。目前在設計更復雜的基因載體時,PEI經(jīng)常做為核心組成成分。

      線性聚乙烯亞胺(Line PEI)轉(zhuǎn)染復合物的細胞毒性低,有利于細胞定位,而且轉(zhuǎn)染率*。

      Polyscience公司的兩款明星產(chǎn)品線性聚乙烯亞胺(23966-124765-1)近年來越來越多的受到研究者們的青睞。其產(chǎn)品被運用到大量的轉(zhuǎn)染實驗中,也出現(xiàn)在大量的文獻中。

      Polyscience公司成立于1961年,總部位于賓夕法尼亞州沃靈頓,是一家生產(chǎn)研發(fā)化學產(chǎn)品的公司。該公司的產(chǎn)品種類已經(jīng)累計超過3000種,其產(chǎn)品的特點是體積小,附加值高。

      公司產(chǎn)品主要包含:

      1. 單體和聚合物
      2. 微球和粒子(有機、無機、可生物降解、磁珠、熒光素、染料、特異性抗體和蛋白包被顆粒,直徑從40nm10mm)用于核酸提取、蛋白分離和純化等。
      3. 高性能粘合劑、涂料和密封劑

      23966-1

      Polyethylenimine, Linear,MW 25000,Transfection Grade (PEI 25K)

      化學性質(zhì):

      CASNO.

      9002-98-6,26913-06-4

      分子式

      (CH2CH2NH)n

      分子量

      25,000

      熔點

      73-75º 

      溶解度

      SolubleIn: hotwater,coldwateratlowpH,methanol,andethanol.

      InsolubleIn: benzene,ethyletherandacetone

      Appearance

      Whitetoyellowsolid

      24765-1(更高效的PEI聚乙烯亞胺聚合物轉(zhuǎn)染試劑)

      PEI MAX-Transfection Grade Linear Polyethylenimine Hydrochloride (MW40,000)

      基本描述:

      PolyethylenimineHClMAX,Linear,Mw40,000PEI40,000)是熱賣產(chǎn)品線性化聚乙烯亞胺PEI25,000的升級產(chǎn)品,不同之處在于1)*水解(去乙酰化);2PEI25000的鹽酸鹽形式,具更高的水溶特性;3)含更長連續(xù)性乙烯亞胺(ethyleneimine)片段,其質(zhì)子化氮水平比PEI25,000提高11%以上。本品經(jīng)堿中和后,可轉(zhuǎn)化為線性化自由胺(PEI),此時分子量正相當于25,000。

      ThomasMetal2005)研究數(shù)據(jù)表明,去乙酰化的PEI40,000PolyethylenimineMAX40,000)體外質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率提高21倍,小鼠體內(nèi)靶向效率達到10,000倍,隨之肺部特異療效顯示增強1500倍。

      化學性質(zhì):

      CASNO.

      9002-98-6,26913-06-4

      MolecularWeight

      40,000~22,000freebase

      Solubility

      SolubleIn: Coldandroomtemperaturewater 

      InsolubleIn: Commonorganicsolvents(ethanol,acetone,tetrahydrofuran)

      Appearance

      Whitetooff-whitefreeflowingsolid

       

      使用方法(僅供參考)

      1. Pour ~450 mL of Milli-Q H2O into a 500-mL glass beaker.

      2. Add 500 mg of PEI to the beaker with stirring.

      3. Add concentrated HCl drop-wise to the solution to pH <2.0.

      4. Stir until the PEI is dissolved (~2-3 h). Maintain the pH <2.0 throughout.

      Approximately 800 μL of 12 M HCl will be required for full PEI dissolution. There may still be some small fiber particles that will not dissolve.

      5. Add concentrated NaOH drop-wise to the solution to pH 7.0.

      Approximately 500 μL of 10 M NaOH will be required to neutralize the PEI solution.

      6. Pour the solution into a 500-mL glass cylinder. Adjust the final volume to 500 mL with Milli-Q H2O.

      7. Filter-sterilize the solution through a 0.22-μm membrane.

      8. Store aliquots of the desired volume at -20°C.

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